Título
Identificación y caracterización de las células germinales primordiales (CGPs) en embriones y larvas de Totoaba macdonaldi
Identification and characterization of primordial germ cells (PGCs) in embryos and larvae of Totoaba macdonaldi
Autor
RAQUEL ESCUREDO VIELBA
Colaborador
Miguel Angel del Rio Portilla (Asesor de tesis)
Carmen Guadalupe Paniagua Chávez (Asesor de tesis)
Nivel de Acceso
Acceso Abierto
Materias
Células germinales primordiales, Expresión Vasa, Proteína VASA, Ruta migratoria, Totoaba macdonaldi, Familia Scianidae, Primordial germ cells, Vasa expression, VASA protein, migration pathway, Totoaba macdonaldi, Scianidae family - (AUTOR) BIOLOGÍA Y QUÍMICA - (CTI) CIENCIAS DE LA VIDA - (CTI) BIOLOGÍA CELULAR - (CTI) OTRAS - (CTI) OTRAS - (CTI)
Resumen o descripción
La totoaba (Totoaba macdonaldi), es un pez endémico del Golfo de California con alto potencial tanto económico como ecológico, sin embargo, en la actualidad, es una especie en peligro de extinción. Por lo tanto, el propósito de esta tesis fue caracterizar las células germinales primordiales (CGPs) de este pez perteneciente a la familia Sciaenidae, con dos objetivos: (1) proporcionar la base para la criopreservación de las CGPs para conservar el recurso genético y (2) dar el primer paso para conocer la génesis gonadal y la diferenciación sexual de este pez. El análisis de inmunofluorescencia realizado desde la etapa de 2 células hasta 8 días después de la eclosión (DDE) muestra que la proteína VASA es específica de las CGPs. Estas células se observaron por primera vez en las regiones periférica y dorsal del blastodisco, en aproximadamente el estadio del 50% -epibolia y migraron hacia ambos lados del cuerpo del embrión durante el desarrollo. Finalmente, a los 7 DDE, las CGPs del embrión alcanzaron la zona donde se desarrollará la gónada. El análisis histológico de las larvas mostró el primordio gonadal con un grupo de CGPs en el lado dorsal del peritoneo a los 11 DDE. El crecimiento de la gónada, como resultado de la interacción entre las CGPs y las células somáticas derivadas del peritoneo, se observó a los 16 DDE. Los resultados de qPCR mostraron que la expresión del gen Vasa estaba restringida al desarrollo embrionario y larval temprano, los valores más altos se observaron en la etapa de 2 células y de blástula media, lo que sugiere la herencia materna del ARNm de Vasa. Estos hallazgos apoyan la hipótesis de preformación en las CGPs de T. macdonaldi. El patrón de migración de las CGPs en esta especie, nos permite recomendar el aislamiento y la posterior criopreservación de estas células antes de los 7 DDE cuando el desarrollo embrionario y larval se da a 21 ° C.
The totoaba (Totoaba macdonaldi) is an endemic fish of the Gulf of California with high economic and ecological potential, however, at present, it is an endangered species. Therefore, our purpose was to characterize the Primordial Germ Cells (PGCs) of this Sciaenid with two objectives: (1) to provide the basis for PGCs cryopreservation to preserve the genetic resources and (2) to take the first step to know the gonadal genesis and sex differentiation of this fish. Immunofluorescence analysis performed from 2-cell stage to 8-day after hatch (DAH) shows that VASA protein is specific for PGCs. These cells were first observed in the peripheral and dorsal regions of the blastodisc at approximately the 50%-epiboly stage and migrated to both sides of embryo body during the development. Finally, at 7 DAH the PGCs of the hatching embryo reached the place where the gonad will develop. Histology analysis of larvae showed a genital ridge with enclosed PGCs on the dorsal side of the peritoneum at 11 DAH, gonadal primordium growth was observed as a result of the interaction between PGCs and somatic cells derived from the peritoneum. Results of qPCR showed that Vasa expression was restricted to the embryonic and early larval development, the highest values were observed in 2-cell and mid-blastula stage suggesting the maternal inheritance of Vasa mRNA. These findings support the hypothesis of preformation in T. macdonaldi PGCs. The migration pattern of PGCs allow us to recommend the isolation and subsequent cryopreservation of these cells before 7 DAH when temperature during embryonic and larval development is 21°C.
Editor
CICESE
Fecha de publicación
2018
Tipo de publicación
Tesis de doctorado
Recurso de información
Formato
application/pdf
Idioma
Español
Sugerencia de citación
Escuredo Vielba, R. 2018. Identificación y caracterización de las células germinales primordiales (CGPs) en embriones y larvas de Totoaba macdonaldi. Tesis de Doctorado en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. 89 pp.
Repositorio Orígen
Repositorio Institucional CICESE
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