Author: JOSÉ MARCIANO DE LA CRUZ OLIVARES

Descripción y caracterización de genes dehidrinas en chile piquín (capsicum annuum var. glabriusculum)

JOSÉ MARCIANO DE LA CRUZ OLIVARES (2013)

"Se compararon plantas de dos poblaciones de chile piquín, que crecen en condiciones de humedad contrastantes, en cuanto a su respuesta a condiciones de estrés hídrico en invernadero e In vitro. Los tratamientos consistieron en suspender el riego durante 16 días más un riego de recuperación y una evaluación final a 19 días. Las plantas control se regaron normalmente, se midió la tensión de agua en el suelo, potencial hídrico en hojas antes del amanecer y el contenido relativo de agua en las hojas. Las condiciones de estrés hídrico In vitro solo consistieron en poner hojas de plantas de chile a desecar en cajas Petri. En ambos experimentos (en invernadero e In vitro) se hizo análisis de la expresión por RT-PCR. También se hizo la caracterización del gen de dehidrina Tas14 en plantas de chile piquín adultas, esto se realizó haciendo Genome Walking y un posterior análisis bioinformático de la secuencia. Los datos de potencial hídrico y contenido relativo de agua en las hojas indicaron que la población de Coahuila perdió menos agua respecto a la población de Veracruz. En el análisis de expresión de dehidrinas solo se observaron diferencias en el gen KS18 que si parece responder al gradiente de la perdida de agua en condiciones de desecación de plantas de chile piquín. Los condiciones en las que se realizó el ensayo de sequía en plantas de chile y de acuerdo a los parámetros fisiológicos medidos determinan que el estrés hídrico impuesto fue severo, sin embargo las plantas recurren a otros mecanismos diferentes al de expresión de dehidrinas analizadas. Con la técnica de Genome Walking se obtuvo una secuencia de Tas14 de 610 pb, esta secuencia se ensambló con un cDNA de la base de datos de CINVESTAV, lo que da como resultado una secuencia de 1648 pb que contiene a toda la EST más el intrón detectado, la secuencia incluye una parte del promotor, la caja TATA está en la posición 464 y esto da la oportunidad de detectar algunos factores de regulación de transcripción."

The aim study was to campare two populations of “chile piquin” to test the response to water stress in greenhouse and In vitro. The treatments consisted in stop the watering during 16 days plus a three-day recovery period after watering. The control plants were irrigated every day. Several parameters were measured were water tension within the soil, leaf water potencial before sunrise and leaf relative water content. The In vitro water stress exoeriment was imposed to the chile plants by simply letting the chile leaves to dehydrate in Petri dishes. The Capsicum Dhn1, Dhn13, Tas14 and KS18 gene expression was analyzed by RT-PCR in both experiments. The data of water stress and relative water content in leaves indicated that the population of Coahuila lost less water in relation to the population of Veracruz. Within the analysis of dehydrin expression, only KS18 seems to be a water stress responsive gene under the conitions studied. The water stress accomplished was severe according to the conditions imposed and the physiological parameters measured; therefore, we concluded that chile piquin plants utilize different mechanisms to cope with water stress than those in which the dehydrins analyzed in this paper are involved

Master thesis

Proteínas Sequía Transcripción CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA