Title

Biosensores electroquímicos de ADN para la detección del Virus del Papiloma humano (VPH) basados en las metodologías: “Frecuencia característica” y “Corriente de relajación”

Author

JOSE ROBERTO ESPINOSA LUMBRERAS

Access level

Open Access

Summary or description

The present thesis reports the development of two electrochemical methods for HPV-16 sensing by using a DNA modified gold electrode which is based on potential and current relaxation measurement of the electrode composed double layer. The methods used allowed us to propose an equivalent circuit of DNA/Au electrode which was corroborated by electrochemical impedance spectroscopy (EIS) measurements. The increase in the potential relaxation and charge transfer resistance were used for sensing the DNA hybridization, using Fe(CN)64-/Fe(CN)63 as an electrochemical indicator. In order to determinate the potential and current relaxation of the composed double layer, the faradic and double layer current contributions were separated by using a rectifier diode arrangement. The target HPV-16 DNA sequence was quantified in a concentration interval from 1nM to 1000nM, a detection limit of 0.3nM was obtained. The biosensor shown an effective discrimination between a single-base mismatched sequence and the fully complementary HPV-16 DNA target.

La presente tesis reporta el desarrollo de sensores para la detección de VPH-16 fundamentados en dos métodos electroquímicos, los cuales se basan en la medición del potencial y la corriente de relajación de la doble capa en electrodos de Au modificados con ADN. Los métodos utilizados permitieron proponer un circuito equivalente del electrodo Au/ADN el cual fue corroborado con mediciones hechas por espectroscopía de impedancia electroquímica (EIS) en los mismos electrodos. El aumento en el potencial de la relajación y la resistencia de transferencia de carga se utilizó para detectar la hibridación de ADN, usando el par Fe(CN)64-/Fe(CN)63 como indicador electroquímico redox. Con el fin de determinar el potencial y la corriente de relajación en la doble capa, las contribuciones faradaicas y no- faradaicas a la corriente fueron separadas mediante el uso de un diodo rectificador. La secuencia de ADN blanco del HPV-16 se detectó en un intervalo de concentración de 1 nM a 1000 nM, y fue obtenido un límite de detección de 0.3 nM. Los biosensores mostraron una discriminación efectiva entre una secuencia no complementaria (un solo mismatch) y el ADN totalmente complementario del VPH-16.

Producción Científica de la Universidad Autónoma de Zacatecas UAZ

Publish date

October, 2016

Publication type

Doctoral thesis

Format

application/pdf

Language

Spanish

Audience

General public

Source repository

Repositorio Institucional Caxcán

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