Título

Expresión génica diferencial de tres fenotipos de vidrillo (Mesembryanthemum crystallinum) en respuesta a estrés por NaCl

Autor

CARLOS ARIEL CABADA TAVARES

Colaborador

GRACIA ALICIA GOMEZ ANDURO (Director)

Nivel de Acceso

Acceso Abierto

Resumen o descripción

"Con la finalidad de identificar genes que se encuentran aumentando y reprimiendo sus

niveles de expresión en respuesta a estrés por NaCl en vidrillo, utilizamos la metodología

de microarreglos heterólogos, donde el nivel de expresión de 30,000 cDNA independientes

de Arabidopsis thaliana fueron utilizados para medir por hibridación con ARN extraído

individualmente de los fenotipos P0, P9 y P11 de vidrillo. Logramos identificar que en el

fenotipo P0: 1893 genes fueron sobre-expresados (6.315%), en el fenotipo P9: 1999 genes

(6.66%), mientras que para el fenotipo P11 solo el 4.61% de los genes fue sobre-expresado

(1383 genes). En cuanto al número de genes reprimidos en los fenotipos P0, P9 y P11

identificamos, respectivamente; 1218, 844 y 1594 genes regulados de manera negativa.

Algunos de estos genes regulados diferencialmente, ya sea positiva o negativamente, son

expresados de manera única en cada fenotipo. Un análisis informático mostró que existen

diferencias en algunas rutas metabólicas de interés como por ejemplo, en el metabolismo de

aminoácidos solo los fenotipos de P0 y P9 aumentan el nivel de expresión de genes

relacionados con el metabolismo de arginina y prolina, cuya acumulación en la planta esta

relacionada con la tolerancia de la misma ante un estrés, por otro lado el fenotipo P11

disminuye los niveles de expresión de genes involucrados en dicha ruta; además entre los

genes donde se esta dando un aumento en los niveles de expresión en esta ruta,

encontramos genes relacionados con el metabolismo de poliaminas como la putrescina,

espermidina y la espermina, cuya acumulación en la planta tiene efectos positivos en la

tolerancia a diversos tipos de estrés. Por otro lado tenemos que, solo el fenotipo P11

aumenta los niveles de expresión de genes relacionados con el metabolismo de la trehalosa,

un disacárido importante en la tolerancia al estrés. También se identificaron cambios en la

respuesta a estrés oxidativo y en peroxisomas, donde el fenotipo P9 es quien mejor

respuesta tiene..."

"With the objective of identifying genes that are increasing and suppressing expression

levels in vidrillo’s salt stress resistance response, we used heterologous microarray

methodology, where the independent cDNA expression level of 30,000 from Arabidopsis

thaliana was used to measure RNA hybridization extracted individually from P0, P9, and

P11 vidrillo phenotypes. We identified that 1893 P0 phenotype genes were over-expressed

(6.315%); 1999 P9 phenotype genes (6.66%); while only 4.61% of P11 phenotype genes

were over-expressed (1383). As for the number of repressed genes in P0, P9, and P11

phenotypes identified, we found 1218, 844, and 1594 negatively regulated genes,

respectively. Some of the differentially regulated genes, either positively or negatively, are

expressed uniquely in each phenotype. The computational analysis showed some

differences in metabolic pathways of interest; for example, in amino acid metabolism only

P0 and P9 phenotypes were able to increase the expression level of genes related to

arginine and proline metabolism, whose accumulation in the plant is related to abiotic stress

resistance. On the other hand, P11 phenotype decreased expression levels of the genes

involved in the same pathway. Also, in this metabolic route where genes were found to

increase their expression levels, we found those related to polyamine resistance such as

putrescine, spermidine, and spermine, whose accumulation in the plant have positive effects

on tolerance to various stress types. Another thing was that only phenotype P11 increased

the expression levels of genes related to the metabolism of trehalose, an important

disaccharide in stress tolerance. We could identify changes in oxidative stress response in

peroxisomes, where P9 phenotype had the best response. It was possible to identify changes

in expression levels of the genes involved in osmotic and salt stress and ion transport

responses, where P0 and P9 phenotypes were those having an apparent best response.

Finally we quantified the relative expression of the antiporter genes McNHx3 and McNHaD

by qPCR; the results showed that only P0 and P9 phenotypes could overexpress these

genes, while P11 phenotype had them suppressed. Thus at least to that reported so far, P11

phenotype does not have a mechanism for Na+ ion compartmentalization as P0 and P9 do;

however, P11 phenotype continues to tolerate NaCl stress to a lesser extent, though."

Editor

Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, S.C.

Fecha de publicación

mayo de 2013

Tipo de publicación

Tesis de maestría

Versión de la publicación

Versión aceptada

Formato

application/pdf

Idioma

Español

Repositorio Orígen

Repositorio Institucional CIBNOR

Descargas

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