Título

Expresión génica diferencial en células blancas de cabrilla sardinera Mycteroperca rosacea ante la infección experimental con Aeromonas hydrophila

Autor

TANIA LIBERTAD LOPEZ MEDINA

Colaborador

FELIPE DE JESUS ASCENCIO VALLE (Director)

Nivel de Acceso

Acceso Abierto

Resumen o descripción

La acuicultura se ve fuertemente afectada por patologías bacterianas que provocan mortalidades en la producción e importantes pérdidas económicas; por ello, uno de los principales retos del sector, es su prevención y eliminación. El estudio del sistema inmune como mecanismo de defensa ante enfermedades nos permite conocer la respuesta de los peces cuando se ven expuestos a una diversidad de agentes patógenos. Una de las estrategias para el estudio del sistema inmune, es la evaluación de la expresión génica bajo cierto estímulo, por ejemplo, la infección experimental. A pesar de que la cabrilla sardinera Mycteroperca rosacea es considerada un candidato potencial de cultivo, no se tienen antecedentes de su capacidad de respuesta ante agentes patógenos comunes en granjas de producción. El propósito de éste trabajo fue investigar la respuesta, con énfasis en la respuesta inmune a nivel transcripcional, de la cabrilla sardinera experimentalmente infectada con la bacteria Aeromonas hydrophila, un importante patógeno secundario capaz de ocasionar severas enfermedades en peces marinos y de agua dulce. Con el fin de obtener una perspectiva más amplia de la respuesta, en el presente trabajo se utilizó la técnica de hibridación sustractiva por supresión para generar una colección de genes expresados por efecto de la infección experimental. Se seleccionaron y secuenciaron aleatoriamente un total de 329 clonas y después de su análisis bioinformático, se obtuvieron un total de 108 secuencias que mostraron identidad con otras especies de teleósteos. La cuantificación del nivel de expresión de cinco transcritos mostró que los cinco se ven expresados por efecto de la infección experimental y dado que tres de las secuencias analizadas están involucradas directamente en rutas de señalización, se sugiere que los mecanismos de transducción de señales tienen un rol importante en la respuesta transcripcional tardía de M. rosacea ante la infección con A. hydrophila.

The most significant factor affecting aquaculture is the incidence of microbial pathologies, mainly bacterial in origin. Nowadays, the main challenges of fish farming industry are prevention and eradication of these diseases that provoke severe mortalities which in turn, cause economic losses. The assessment of immune system as an integrative defense upon bacterial infection enables us to elucidate the mechanisms that regulate this protection and one of the commonly used strategies for its assessment is the evaluation of immune gene expression upon certain stimulus (e.g. experimental bacterial infection). In BCS, leopard grouper Mycteroperca rosacea is considered a potential candidate species for aquafarming, however there are no previous reports of its response capacity when facing farm-common bacterial pathogens. The aim of this work was to investigate the response at a transcriptional level, emphasizing the immune response of leopard grouper experimentally challenged with Aeromonas hydrophila, an important opportunistic bacterial pathogen for several marine and fresh water farmed fish species. In order to obtain a wider perspective of the response displayed, it was employed the suppressive subtractive approach to generate a cDNA library of overexpressed genes after a bacterial experimental infection. Random clones (329) were selected and sequenced. After assembling, 108 singlets were finally obtained, some of which were immune-related genes. A real time reverse transcription-PCR analysis of the expression patterns of five transcripts showed that all of them were upregulated after 72 h of double bacterial challenge stimulation. Since three of the analyzed sequences are involved in signaling pathways, it is proposed that these mechanisms are specially activated in late gene response of leopard groupers experimentally infected with A. hydrophila.

Editor

Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, S.C.

Fecha de publicación

enero de 2010

Tipo de publicación

Tesis de maestría

Versión de la publicación

Versión aceptada

Formato

application/pdf

Idioma

Español

Repositorio Orígen

Repositorio Institucional CIBNOR

Descargas

2574

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