Title

Participación de las proteínas Ssq1p, Jac1p e lsu1p en la tolerancia a etanol de Saccharomyces cerevisiae

Author

Luis Alberto Madrigal Pérez

Contributor

Jesús Campos García (Thesis Adviser)

Access level

Open Access

Summary or description

Instituto de Investigaciones Químico Biológicas. Maestría en Ciencias en Biología Experimental

Protein biogenesis with Fe-S centers is one of the most important metabolic processes between the agencies. In the case of yeasts, this process is by a group of proteins encoded in a set of genes called isc (iron- Sulphur-cluster), among which are the genes SSQ1, JAC1 and ISU1. Proteins with Fe-S centers are involved in a large number of cellular processes such as: phosphorylation Oxidative stress, Krebs cycle, DNA replication and repair, amino acid biosynthesis, others. It is due to the large number of essential metabolic processes dependent, that Biogenesis of Fe-S centers turns out to be an essential mitochondrial metabolic pathway for Cell viability, at least in yeast. The objective of this work was to evaluate the participation of Ssq1p, Jac1p and Isu1p proteins, on the tolerance to ethanol in Saccharomyces cerevisiae. Transformation of the mutant strain of S. cerevisiae UMARN3.3 (Ura-) was performed. This strain Was transformed with the plasmids pYES2-SSQ1 (HIS) WT, pYES2-JAC1 (HIS) WT, pYES2- ISU1 (HIS) WT and pYES2. Transformation with these plasmids generated the strains UMARN3.3- SSQ1, UMARN3.3-JAC1, UMARN3.3-ISU1 and UMARN3.3-pYES2. The identification of the Proteins encoded by the cloned genes (Ssq1p, Jac1p and Isu1p) were performed by Western Blot. With the certainty of having the transforming strains with the correct expression of their proteins Ethanol tolerance analyzes were performed by Concentrations of ethanol. The results showed that the UMARN3.3- ISU1 and UMARN3.3-JAC1 presented better growth in the face of ethanol stress, Comparison with the UMARN3.3-SSQ1 strain and control with the vector.

La biogénesis de proteínas con centros Fe-S es uno de los procesos metabólicos más conservados entre los organismos. En lo que respecta a las levaduras, este proceso se lleva a cabo por un grupo de proteínas codificadas en un conjunto de genes denominados isc (iron- sulphur-cluster), entre los que se encuentran los genes SSQ1, JAC1 e ISU1 . Las proteínas con centros Fe-S están implicadas en gran número de procesos celulares como: fosforilación oxidativa, ciclo de Krebs, replicación y reparación del ADN, biosíntesis de aminoácidos, entre otros. Es debido al gran número de procesos metabólicos esenciales dependientes, que la biogénesis de centros Fe-S resulta ser una ruta metabólica mitocondrial esencial para la viabilidad celular, por lo menos en levaduras. El objetivo de éste trabajo fue evaluar la participación de las proteínas Ssq1p, Jac1p e Isu1p, sobre la tolerancia a etanol en Saccharomyces cerevisiae. Se realizó la transformación de la cepa mutante de S. cerevisiae UMARN3.3 (Ura -). Esta cepa se transformó con los plásmidos pYES2-SSQ1 (HIS) WT, pYES2-JAC1 (HIS) WT, pYES2- ISU1 (HIS) WT y pYES2. La transformación con estos plásmidos generó las cepas UMARN3.3- SSQ1, UMARN3.3-JAC1, UMARN3.3-ISU1 y UMARN3.3-pYES2. La identificación de las proteínas codificadas por lo genes clonados (Ssq1p, Jac1p e Isu1p) se realizó por Western blot. Con la certeza de tener las cepas transformantes con la correcta expresión de sus proteínas recombinantes, se hicieron los análisis de tolerancia a etanol mediante pruebas con concentraciones crecientes de etanol. Los resultados mostraron que las cepas UMARN3.3- ISU1 y UMARN3.3-JAC1 presentaron un mejor crecimiento ante el estrés por etanol, esto en comparación con la cepa UMARN3.3-SSQ1 y el control con el vector.

Publisher

Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

Publish date

February, 2010

Publication type

Master thesis

Format

application/pdf

Language

Spanish

Source repository

Repositorio Institucional de la Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

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