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Development of an advanced biophotonic platform for studies and applications with live biological samples

Desarrollo de una plataforma biofotónica avanzada para estudios y aplicaciones con muestras biológicas vivas

BEATRIZ ALINA JUAREZ ALVAREZ (2021)

A biophotonic platform incorporating various optical techniques into a single system was designed, built, and characterized. The primary goal of building this kind of system was to study living cells. The techniques incorporated as modules into an inverted optical microscope were optical trapping with a single trap or dynamically reconfigurable multiple traps, back focal plane interferometry, and fluorescence microscopy. An integrated instrument control program with a graphical user interface was developed to maximize the system’s capabilities and simplify data acquisition. It allowed the simultaneous or independent use of the optical techniques. The system was used to study green biflagellated microalgae Dunaliella tertiolecta placed in a 50 μm thick glass chamber. Optical trapping without apparent photodamage of this highly motile microorganism was possible with a 1064 nm wavelength laser. Excitation of the chlorophyll fluorescence in the microalgae’s body was done with a 405 nm wavelength laser. Back focal plane interferometry was applied to record the cell’s motility, obtaining the rotation frequency of the body and flagella as the microalgae were held in the optical trap. One of the main results of using the developed biophotonic platform was the in vivo observation of laser-induced detachment of Dunaliella tertiolecta from a glass surface, providing some insight into the photostimulus produced by near-infrared light on this species. The biophotonic platform techniques were tested individually and imultaneously, demonstrating that the developed system can be a reliable tool to study live cells.

En este trabajo se diseñó, construyó y caracterizó una plataforma biofotónica que incorpora diversas técnicas ópticas en un solo sistema. El objetivo principal de la construcción de este tipo de sistema fue estudiar células vivas. Las técnicas incorporadas como módulos a un microscopio óptico invertido fueron el atrapamiento óptico con una sola trampa o con trampas múltiples reconfigurables dinámicamente, interferometría de plano focal posterior, y microscopía de fluorescencia. Un programa para control de la instrumentación con una interfase gráfica de usuario fue desarrollado para maximizar las capacidades del sistema y simplificar la adquisición de datos. Esto permitió el uso simultáneo o independiente de las técnicas ópticas. El sistema se utilizó para estudiar microalgas verdes biflageladas Dunaliella tertiolecta colocadas en una cámara de vidrio de 50 μm de espesor. El atrapamiento óptico sin fotodaño aparente de este microorganismo de alta motilidad fue posible con un laser de longitud de onda de 1064 nm. La excitación de la clorofila del cuerpo se realizó con un láser de longitud de onda de 405 nm. La interferometría de plano focal posterior se aplicó para capturar la motilidad de la célula, obteniendo las frecuencias de rotación del cuerpo y los flagellos mientras la célula se encontraba detenida en una trámpa óptica. Uno de los principales resultados obtenidos al utilizar la plataforma biofotónica desarrollada fue la observación in vivo del desprendimiento inducido por láser de Dunaliella tertiolecta de una superficie de vidrio, proporcionando información sobre el fotoestímulo producido por luz en el infrarojo cercano en esta especie. Las técnicas de la plataforma biofotónica se probaron de forma individual y simultánea, demostrando que el sistema desarrollado puede ser una herramienta confiable para el estudio de células vivas.

Doctoral thesis

optical trapping, microalgae, photostimulus atrapamiento óptico, microalgas, fotoestímulo INGENIERÍA Y TECNOLOGÍA CIENCIAS TECNOLÓGICAS TECNOLOGÍA DE LA INSTRUMENTACIÓN INSTRUMENTOS ÓPTICOS INSTRUMENTOS ÓPTICOS

Evolución molecular del sueño unihemisférico en Cetáceos y Pinnípedos: una aproximación genómica comparativa

Molecular evolution of unihemispheric sleep in Cetaceans and Pinnipeds: a comparative genomics approach

Sebastián Álvarez Costes (2021)

El sueño unihemisférico de onda corta es muy inusual en vertebrados, y se caracteriza por la presencia de ciclos NREM y ausencia de REM. Este sueño solo está presente de manera obligada en Cetáceos y de manera facultativa en algunos Pinnípedos y otros grupos de organismos. Sobre el sueño unihemisférico se conoce el funcionamiento fisiológico y las diferencias con el sueño bihemisférico, sin embargo, existen interrogantes acerca de su origen, evolución y base genética. El objetivo de este trabajo fue identificar los genes reguladores del sueño unihemisférico en Cetáceos y Pinnípedos mediante genómica comparativa. Para ello se identificaron los genes ortólogos relacionados con procesos del sueño compartidos entre Cetáceos y Pinnnipedos, se llevó a cabo una reconciliación del árbol de genes relacionados con el sueño y el árbol filogenéticos de mamíferos lo que permitió identificar los genes relacionados al sueño unihemisférico. Además, se evaluó la tasa de selección de esos genes en ramas clave del árbol evolutivo y se infirió su estado ancestral distintos puntos de la historia evolutiva. La reconciliación de árboles de genes con el árbol de especies demostró que entre los posibles genes reguladores del sueño unihemisférico están CASP1 en Cetáceos y PER3 en Cetáceos y Otáridos. CASP1 es importante por su función en la ruta metabólica de los ciclos NREM de Cetáceos, que requieren de una mayor influencia de este gen para regular sus ciclos. Para PER3 se demostró que existe un patrón de selección que beneficia a los homocigotos en Pinnípedos, es posible que la selección que actúa sobre este gen les haya conferido la adaptación a los primeros Pinnípedos y a los Otáridos para poder mantenerse en sueño NREM. Las reconstrucciones del estado ancestral de estos genes demostraron que existen sustituciones de aminoácidos particulares en CASP1 de Cetáceos desde su último ancestro común y sustituciones de aminoácidos particulares en PER3 de Pinnípedos y una pérdida de 7 aminoácidos en Phócidos. Estos resultados sugieren que PER3 es un gen que influencia el sueño unihemisférico en Cetáceos y en Otáridos y que CASP1 es el posible responsable de que los Cetáceos presenten el sueño unihemisférico de manera obligada. Futuros estudios enfocados en estas proteínas permitirán evidenciar las características estructurales que les confieren estas similitudes y diferencias en el sueño unihemisférico, así como las diferentes ventajas adaptativas que estas ...

Short-wave unihemispheric sleep is very unusual in vertebrates, characterized by the presence of NREM cycles and the absence of REM. This type of sleep is obligatory in Cetaceans and facultative in some Pinnipeds and other groups of organisms. Regarding unihemispheric sleep in these species, the physiological functioning and differences with bihemispheric sleep are known, however, there are questions about its origin, evolution and genetic basis. The objective of this study was to identify unihemispheric sleep regulatory genes in Cetaceans and Pinnipeds using comparative genomics. The orthologous genes related to sleep processes and shared between these two groups of organisms were identified, a reconciliation of the tree of genes related to sleep and species tree of Cetaceans and Pinnipeds was carried out to identify those related to unihemispheric sleep. The selection rate of these genes in key branches of the evolutionary tree was evaluated and their ancestral sequence was inferred at different points in evolutionary history. The reconciliation of gene trees with the species tree showed that the possible unihemispheric sleep regulatory genes are CASP1 in Cetaceans and PER3 in Cetaceans and Otharids. CASP1 was only observed in Cetaceans and due to its function in the metabolic pathway of the NREM cycles, these species require a greater influence of this gene to regulate these cycles. For PER3 there is a selection pattern that benefits homozygosity in Pinnipeds. Therefore, it is possible that the selection that acts on this gene has conferred adaptation to the first Pinnipeds and Otharids to be able to stay in NREM sleep. The ancestral gene reconstruction of CASP1 revealed derived amino acid substitutions in Cetaceans inherited from their last common ancestor. Likewise, derived amino acid substitutions were identified in Pinniped PER3 and 7 aminoacid deletions in Phocids. These results suggest that PER3 is a gene that influences unihemispheric sleep in Cetaceans and Otharids and that CASP1 is possibly responsible for the fact that Cetaceans present obligatory unihemispheric sleep. Future studies focused on these proteins could allow to demonstrate the structural characteristics that these similarities and differences confer on them in unihemispheric sleep, as well as the different adaptive advantages that these proteins could give them and if there is a molecular evolutionary convergence.

Master thesis

Sueño unihemisférico, sueño NREM, genómica comparativa, Cetáceos, Pinnípedos, CASP1, PER3 Unihemispheric sleep, NREM sleep, comparative genomics, Cetaceans, Pinnipeds, CASP1, PER3 BIOLOGÍA Y QUÍMICA CIENCIAS DE LA VIDA ETOLOGÍA ANIMAL ANIMAL

Acumulación diferencial de poliaminas y de los transcritos de las argininas descarboxilasas de Arabidopsis durante la interacción con dos cepas de Trichoderma

Fatima Berenice Salazar Badillo (2016)

"Dentro de su entorno las plantas interaccionan con una amplia gama de microorganismos. El estudio de estas interacciones se ha centrado en aquellas consideradas como patogénicas, por lo cual, es necesario estudiar la biología, la bioquímica y genética de las interacciones benéficas. El presente trabajo se enfocó en dilucidar algunas de las moléculas involucradas en la promoción de crecimiento ejercido en plántulas de Arabidopsis thaliana por el hongo benéfico Trichoderma spp., en una interacción a distancia y en contacto directo. Por lo anterior, lo primero que se llevó a cabo fue el análisis de parámetros de crecimiento vegetal tales como peso fresco, longitud de raíz principal y número de raíces secundarias de Arabidopsis thaliana en la interacción en contacto directo y a distancia con dos cepas del hongo Trichoderma, T. virens y T. atroviride, a los 3 y 5 días post inoculación. En ambos tiempos de interacción se observó un incremento en el crecimiento y desarrollo de las plántulas, así mismo el número de las raíces laterales aumento e interesantemente la raíz principal no inhibió su crecimiento en las plántulas que interaccionaron a distancia con respecto a las plántulas en interacción directa. Lo anterior, nos llevó a estudiar ciertas moléculas involucradas en el en el crecimiento y desarrollo de las plantas, tales como las poliaminas y las auxinas. Las poliaminas son pequeñas moléculas implicadas en el crecimiento y desarrollo de la planta, así como en el establecimiento de las interacciones planta - microorganismo. Mientras que las auxinas son pequeñas hormonas vegetales producidas en muy bajas concentraciones, las cuales también juegan un papel clave en el desarrollo de las plantas. En lo que respecta a las poliaminas se analizó el perfil de las poliaminas superiores putrescina, espermidina y espermina en la interacción Arabidopsis – Trichoderma en el sistema dividido y a distancia. Los resultados mostraron un perfil diferencial de estas poliaminas, lo cual es dependiente del tiempo de interacción, tipo de interacción, así como de la especie de Trichoderma. Finalmente en lo que respecta a las auxinas se analizó la expresión de dos de los factores de respuesta a auxinas, el ARF6 y ARF8. Los resultados mostraron una expresión diferencial en ambos genes, la cual fue dependiente de las condiciones de la interacción, lo cual se relaciona directamente con el crecimiento vegetativo de las plantas."

"Within their environment plants interact with a wide range of microorganisms. The study of interactions has focused on those considered to be pathogenic, whereby it is necessary understand the biology, biochemistry and genetics of beneficial interactions. This research focused in analyze some molecules involved in the growth promotion exerted on Arabidopsis seedlings by the beneficial fungus Trichoderma spp., in a direct contact and split system interaction. We quantified biomass production and parameters of root architecture such as primary root length, number of emerged lateral roots, and lateral root density at 3 or 5 days post-inoculation (dpi) during direct contact and split system interaction with the two fungal strains used: Trichoderma virens and Trichoderma atroviride. In both times of interaction an increase in growth and development of plantlets, as well as an increase on number of lateral roots was observed. Interestingly not inhibition of primary root length was observed on plantlets that growth without fungus contact. The above, led us to study molecules involved in the growth and development of plants, such as polyamines and auxin. Polyamines are small molecules implicated in several plant growth and developmental processes, also in the establishment of plant - microbe interactions. Auxins are small plant hormones produced in very low concentrations, which play a key role in the development of plants. Regarding to polyamines, the free levels of the main polyamines in plants, putrescine, spermidine and spermine were quantified in the Arabidopsis – Trichoderma split and contact interaction. The results showed a differential profile of these polyamines, which are dependent of time and type of interaction, as well as the Trichoderma species. Finally the expression of two auxin response factors, ARF6 and ARF8, were analyzed. The results showed differential expression in both genes, this was dependent on the conditions of interaction, therefore is directly related to the vegetative growth of plants. Overall, our results show that growth regulators such as auxin and polyamines play a role in the Arabidopsis – Trichoderma interaction."

Doctoral thesis

Arabidopsis thaliana Trichoderma atroviride Trichoderma virens Poliaminas Auxinas Interacción a distancia BIOLOGÍA Y QUÍMICA CIENCIAS DE LA VIDA BIOLOGÍA MOLECULAR BIOLOGÍA MOLECULAR

Establecimiento de un cultivo de células en suspensión de carica papaya que expresa el péptido protector contra la cisticercosis ketc7 y evaluación de su actividad antiparasitaria

ANA LILIA PEREZ RAMOS (2019)

RESUMEN

A partir de callos friables previamente adaptados en condición de oscuridad se establecieron

cultivos de células en suspensión de Carica papaya: un cultivo silvestre (WT) y un cultivo

transgénico C23 que expresa el péptido KETc7 de la vacuna contra la cisticercosis S3Pvac.

Ambo cultivos crecieron en medio líquido B5 con los fitorreguladores ácido 2,4-diclorofenoxiacético y cinetina 2 mg L-1. Este estudio se realizó en dos etapas; en la primera se llevó

a cabo la determinación de parámetros cinéticos: se estableció la cinética de crecimiento en

matraz agitado con 6 % de inóculo por 42 días, se analizó la viabilidad celular, el pH del

medio de cultivo, el consumo de azúcares totales, la concentración de proteína total y la

cuantificación del péptido KETc7. Se determinó para C. papaya WT una velocidad de crecimiento de 0.05 d-1 y una biomasa máxima de 10.12 g L-1. La línea transgénica C23 presentó

una µ igual a 0.10 d-1 y biomasa máxima de 14.36 g L-1. Considerando la capacidad antiparasitaria reportada de algunos componentes de la papaya, se analizó en una segunda etapa la

actividad nematicida de los cultivos en suspensión contra el nematodo parásito H. contortus,

el cual es de importancia en el área pecuaria. Los bioensayos se realizaron en placas de microtitulación de 96 pozos. Se utilizó una concentración de 1 mg/mL de la biomasa celular

disuelta en PBS pH 7.4, como control negativo se utilizó el medio Hanks, y como control

positivo Ivermectina 5 mg/mL. Se colocó un promedio de 100 larvas L4 sin vaina en cada

pozo (n=6). Posteriormente se realizaron lecturas a las 72h. El análisis estadístico que se

utilizó fue un diseño completamente al azar en el programa SAS V9. La incubación de la

biomasa WT con larvas L4 de Haemonchus contortus indujo un porcentaje de mortalidad

17.52 al día 30 de crecimiento, mientras que la biomasa proveniente de la línea transgénica

C23 de 44.59 a los 12 días de crecimiento, siendo estos últimos los porcentajes más altos. En

este trabajo de tesis se establecieron cultivos de células en suspensión de papaya: uno no

modificado y otro expresor del péptido KETc7, y se demostró la actividad nematicidad de

los mismos. Como perspectivas del presente estudio se propone determinar los valores CL50

y CL90, y continuar con un fraccionamiento biodirigido de la biomasa celular, para purificar

y elucidar las moléculas responsables de la actividad nematicida contra parásitos de importancia pecuaria.

ABSTRACT

Using callus growing under darknesse condition the establishment of suspension cell cultures

of Carica papaya: wild type (WT) and the C23 transgenic line that expresses the KETc7 of

the vaccine againt cysticercosis S3Pvac. Both lines grew in liquid B5 medium added with

the phytoregulators 2,4-dichlorophenoxyacetic acid and kinetin 2 mg L-1. This study was

carried out in two stages; in the first stage of the kinetics parameters was carried out, as well

as cell viability, pH of the culture medium, consumption of total sugars, total protein concentration, and quantification of the KETc7 peptide. A maximum growth velocity of 0.05 d1

and a maximum biomass of 10.12 g L-1 were determined for C. papaya WT. The transgenic

line C23 showed a μ 0.10 d-1 and a maximum biomass of 14.36 g L-1. The nematicidal activity

against the parasite H. contortus was analyzed in the second stage, which is important in the

livestock area. The bioassays were performed in 96-well microtiter plates. A concentration

of 1 mg/mL of the biomass dissolved in PBS pH 7.4, was used the Hanks medium as a negative control, and the positive control Ivermectin 5 mg/ml. An average of 100 larvae without

pod were placed in each well (n = 6). Seventy-two hours, readings were made. The SAS V9

program was used for the statistical analysis using a random desing. The incubation of the

WT biomass with L4 larvae of Haemonchus contortus induced a mortality percentage of

17.52 at day 30 of growth, whereas the biomass from the C23 transgenic line presented

44.59% at 12 days of growth, being these percentages highest. In the present work cell suspensions cultures of wild type papaya and KETc7 peptide expressors were established and

their nematicidal activity were demonstrated. The perspectives of the present study are to

determine the LC50 and LC90 lethal concentrations and to continue with the bioguided fractionation of cell biomasses in order to purify and elucidate the molecules responsibles for the

nematicidal activity against parasites of livestock importance.

Master thesis

BIOLOGÍA Y QUÍMICA CIENCIAS DE LA VIDA

Participación del Sitio de Unión a Calcio en la Selectividad Aniónica del Canal de Cloruro Activado por Calcio TMEM16A

Odalys Grisell Posadas García (2020)

"TMEM16A es una proteína canal de cloruro (Cl-) activado por incrementos en el calcio (Ca2+) intracelular que se encuentra en las membranas biológicas. La salida del ion Cl- a través de TMEM16A regula la secreción de fluidos epiteliales, contracción del músculo liso y sensibilidad al dolor por calor, entre otros procesos biológicos. El canal es un homodímero. Cada monómero tiene un poro para el paso de los iones. El canal cuenta con un sitio de unión a Ca2+ adyacente al poro. El sitio de unión está formado por las cadenas laterales de E654, E702, E705, E734 y D738. En cada sitio de unión se unen dos iones Ca2+. A pesar de que una de las propiedades fundamentales de los canales iónicos es su capacidad para seleccionar al ion que atraviesa por el poro, TMEM16A presenta una selectividad iónica baja. Estudios variados han identificado la siguiente secuencia de selectividad: tiocianato (SCN-) > nitrato (NO3-) > ioduro (I-) > bromuro (Br-) > Cl- > fluoruro. Sin embargo, se desconocen los elementos de la proteína involucrados en la selección del ion Cl-. El objetivo de mi trabajo de tesis es determinar si la naturaleza química del sitio de unión a Ca2+ participa en el proceso de selectividad aniónica en el canal TMEM16A. Usualmente, la selectividad iónica se establece usando la permeabilidad del ion en el poro. El ordenamiento de mayor a menor de la permeabilidad define la secuencia de selectividad. Para determinar si el sitio de unión a Ca2+ participa en la selección del anión permeante, registré la corriente eléctrica que fluye a través del canal TMEM16A silvestre y de los canales con el sitio de unión a Ca2+ mutado (mutantes E702Q, E705Q y E702Q/E705Q) usando la técnica de fijación del voltaje mediante Patch-clamp en configuración de célula completa. Realicé los experimentos con diferentes soluciones extracelulares conteniendo uno de los siguientes aniones principales: SCN-, NO3-, I-, Br-, Cl- o Glutamato. A partir de las medidas del potencial de inversión determiné la permeabilidad para estos aniones relativa a la permeabilidad del ion Cl-. Mis datos muestran que la selectividad aniónica del canal TMEM16A silvestre es SCN- > NO3- > I- > Br- > Cl- > Glutamato, mientras que la selectividad de las mutantes E702Q y E705Q es I- = SCN- > NO3- = Br- > Cl- > Glutamato y I- = NO3- = Br- = SCN- > Cl- > Glutamato, respectivamente."

"The calcium-activated chloride (Cl-) channel TMEM16A has been associated with epithelial fluid secretion, smooth muscle contraction, and heat pain sensibility. TMEM16A is a homodimer with two pores, one in each monomer. Each pore function serves as permeation pathway for ions. TMEM16A has two identical Ca2+ binding sites, one in each monomer, located adjacent to the permeation pathway and near the intracellular side. The Ca2+ binding site is formed by the side chains of E654, E702, E705, E734, and D738. Two Ca2+ ions are bound to each site in a voltage- dependent manner. A fundamental property of ionic channels is their ability to select among different ions, a property named ionic selectivity. Typically, ionic selectivity is reported relative to the physiological permeant ion. Hence, relative to chloride, TMEM16A has low ionic selectivity for other anions. Various studies agree about the selectivity sequence of TMEM16A: thiocyanate (SCN-) > nitrate (NO3-) > iodide (I-) > bromide (Br-) > Cl- > fluoride. However, it is unknown the element or domains involved in anion selection. The aim of my thesis is to determine whether the chemical nature of the Ca2+ binding site plays a role in anion selectivity by the TMEM16A channel. Experimentally, the ionic selectivity is quantitated by the permeability ratio (Permeability of anion X-/ Permeability of Cl-) at the pore calculated using the reversal potentials and the Goldman-Hodgkin-Katz equation. The arrangement of permeability ratios from high to low values defines the selectivity sequence. To determine if de Ca2+ binding site participates in the ionic selectivity I registered the current flowing through the wild type TMEM16A channel and through channels with the Ca2+ binding site muted (E702Q, E705Q, and E702Q / E705Q mutants). I used the “patch-clamp” technique in whole-cell configuration to record the macroscopic currents. I recorded the channel activity exposed to different extracellular solutions containing different anions SCN- or NO3-, or I-, or Br-, or Cl-, or Glutamate. First, I recorded the current in the present of Cl- in the bath and then replaced 100% of Cl- with a given test anion X- and recorded again the currents from the same cell. With the resulting currents, I constructed current versus voltage curves to determine the reversal potential in the presence of Cl- and in the presence of anion X-."

Master thesis

TMEM16A Permeabilidad Canal iónico Patch-clamp BIOLOGÍA Y QUÍMICA CIENCIAS DE LA VIDA BIOFÍSICA BIOFÍSICA

Análisis teórico de los operadores lineales diagonalizables con base en la teoría APOE.

ESTEBAN MENDOZA SANDOVAL FLOR MONSERRAT RODRIGUEZ VASQUEZ Jesús Romero Valencia (2019)

Debido a la abstracción de algunos conceptos del álgebra lineal y la formalidad con la que se suele tratarse a esta asignatura, el aprendizaje por parte de los estudiantes sigue siendo endeble. Respecto a los operadores lineales que son diagonalizables como foco de investigación se encuentran estudios o acercamientos a conceptos relacionados, así como estrategias con el uso de tecnología para mejorar el aprendizaje sobre la diagonalización de matrices. Por ende, se realiza un estudio sobre la comprensión de los operadores lineales diagonalizables en estudiantes de una licenciatura en matemáticas o una carrera a fin de la Universidad Autónoma de Guerrero (UAGro), México con base en la teoría APOE. Concretamente se presenta el resultado de la primera componente del ciclo de investigación que propone dicha teoría, una descomposición genética hipotética de los operadores lineales diagonalizables.

Book part

HUMANIDADES Y CIENCIAS DE LA CONDUCTA PEDAGOGÍA TEORÍA Y MÉTODOS EDUCATIVOS

Desarrollo del pensamiento crítico en los alumnos de la licenciatura en Derecho en Chiapas

VALERIA CANTU GONZALEZ (2021)

https://orcid.org/0000-0003-4887-6899

El proyecto tuvo como objetivo desarrollar la competencia del pensamiento crítico en los alumnos de educación superior. Esto considerando la importancia que reviste a esta competencia transversal para el futuro profesional de los estudiantes. Para este fin se implementó un proyecto de intervención de procedimientos de análisis y uso de la información, enfocado al desarrollo del pensamiento crítico desde los aspectos de habilidades y disposiciones. Para ello se trabajó con un grupo de 16 estudiantes de 3er semestre de la licenciatura en Derecho de la Facultad Libre de Derecho de Chiapas en Tuxtla Gutiérrez, Chiapas. La intervención se centró en desarrollar actividades con los estudiantes utilizando como herramientas principales el aprendizaje basado en problemas (ABP) y la lectura crítica. Los resultados obtenidos mostraron mejoras en casi todas las dimensiones relacionadas al pensamiento crítico, tanto en habilidades como disposiciones. La autopercepción de los estudiantes se vio favorecida en las dimensiones de interpretación y análisis, juicio de una situación específica e inferencia de las consecuencias; mientras que en las habilidades se observaron mejoras en las capacidades de evaluación y explicación de la información. Sin embargo, el cambio generado fue mínimo, es decir, no se puede considerar que las herramientas utilizadas sean las más adecuadas para lograr el desarrollo del pensamiento crítico. En este sentido, es importante observar que la enseñanza del pensamiento crítico es posible, pero es parte de un proceso complejo que requiere hacer uso de varias técnicas que promuevan el pensamiento de orden superior y ofrezca a los estudiantes los espacios para desarrollarlo.

Maestría en Educación

Master thesis

HUMANIDADES Y CIENCIAS DE LA CONDUCTA PEDAGOGÍA TEORÍA Y MÉTODOS EDUCATIVOS MÉTODOS PEDAGÓGICOS