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Physical-chemical quality of Urochloa grasses in different phenological stages.

MARIA DE LOS ANGELES MALDONADO PERALTA ADELAIDO RAFAEL ROJAS GARCIA (2020)

The objective was to evaluate the physical-chemical quality of hybrids Urochloa (Insurgent, Piata and Signal) at different phenological stages, in the dry tropics. The evaluated variables were: total forage yield and per components, intercepted radiation, plant height and crude protein per component. A complete blocks design was used to the random with arrangement in divided plots and four repetitions, with the procedure PROC GLM of SAS. In the three grasses, the best total dry matter yield was obtained at 49 days of regrowth, with 6732 kg DM ha-1 in the Insurgent grass, Piata with 3320 and Signal presented 2675 kg DM ha-1; the leaf component presented a higher percentage of crude protein, at 14 days, reaching 22, 21 and 21% for the Piata, Insurgent and Signal grasses, respectively (P = 0.05).

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Urochloa forage accumulation crude protein CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA CIENCIAS AGRARIAS OTRAS ESPECIALIDADES AGRARIAS

Clonación y expresión funcional de proteínas de la familia LCHR

Yhoana Laura León Márquez (2009)

Instituto de Investigaciones Químico Biológicas. Maestría en Ciencias en Biología Experimental

The presence of high concentrations of chromate in the environment has led to the Selection of bacterial variants resistant to this ion. The determinant of resistance to Chromate most widely studied is the membrane protein ChrA. To date, Studied the ChrA proteins encoded in pseudomonas pUM505 plasmids Aeruginosa, Cupriavidus metallidurans pMOL28, Shewanella sp plasmid 1 and ChrA present in the TnOtChr transposon of Ochrobactrum tritici. ChrA is a protein Which expels chromate in a membrane-dependent manner. In A recent phylogenetic analysis identified 135 homologous ChrA sequences from the Three domains of life. These proteins were clustered in the superfamily of CHR transporters. CHR proteins were classified according to their size in LCHR proteins (345-495 aa) and in SCHR proteins (123-234 aa). LCHR proteins Bacterial infections were, in turn, grouped into six Subfamilies (LCHR1-LCHR6). The - The Burkholderia xenovorans and Burkholderia vietnamiensis proteobacteria are the Which have a higher number of genes encoding LCHR proteins; by way of Jointly present nine LCHR proteins from four distinct subfamilies. In addition to ChrAs mentioned, which are located in the subfamilies LCHR2 and LCHR5, there is no evidence That other members of the LCHR families confer chromate resistance, Objective of the present work is to determine if the LCHR proteins of B. xenovorans and B. Vietnamiensis confer resistance to chromate. One gene from each subfamily was chosen and Amplified by PCR, Were then cloned into a recovery vector for Subsequently subcloned into the vectors pUCP20 and pACYC184, high and low numbers Of copies, respectively.

La presencia de altas concentraciones de cromato en el ambiente ha dado lugar a la selección de variantes bacterianas resistentes a este ión. El determinante de resistencia a cromato más ampliamente estudiado es la proteína de membrana ChrA. A la fecha se han estudiado las proteínas ChrA codificadas en los plásmidos pUM505 de Pseudomonas aeruginosa, pMOL28 de Cupriavidus metallidurans, el plásmido 1 de Shewanella sp y la ChrA presente en el transposón TnOtChr de Ochrobactrum tritici. ChrA es una proteína hidrofóbica que expulsa cromato en forma dependiente del potencial de membrana. En un análisis filogenético reciente se identificaron 135 secuencias homólogas de ChrA de los tres dominios de la vida. Estas proteínas se agruparon en la superfamilia de transportadores CHR. Las proteínas CHR se clasificaron de acuerdo a su tamaño en proteínas LCHR (345–495 aa) y en proteínas SCHR (123–234 aa). Las proteínas LCHR bacterianas fueron, a su vez, agrupadas en seis subfamilias (LCHR1–LCHR6). Las - proteobacterias Burkholderia xenovorans y Burkholderia vietnamiensis son los organismos que presentan un mayor número de genes que codifican proteínas LCHR; de manera conjunta presentan nueve proteínas LCHR de cuatro subfamilias distintas. Además de las ChrAs mencionadas, que se ubican en las subfamilias LCHR2 y LCHR5, no existe evidencia de que otros miembros de las familias LCHR confieran resistencia a cromato, por lo que el objetivo del presente trabajo es determinar si las proteínas LCHR de B. xenovorans y B. vietnamiensis confieren resistencia a cromato. Se eligió un gen de cada subfamilia y se amplificaron por PCR, luego se clonaron en un vector de recuperación para posteriormente subclonarse en los vectores pUCP20 Y pACYC184, de alto y bajo número de copias, respectivamente.

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CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA IIQB-M-2009-0004 Clonación Proteínas LCHR

Diagnóstico de brucelosis caprina por PCR

César Castro García (2007)

Instituto de Investigaciones Químico Biológicas. Maestría en Ciencias en Biología Experimental

Brucellosis is a zoonosis caused by microorganisms of the genus Brucella, produces epizootic abortion in domestic animals and a septicemic febrile illness or infections focused on the human. In Mexico, economic losses are estimated at more than $ 2,000 million a year. Therefore, the present work describes the design of a technique of molecular diagnosis of brucellosis in goats using the Polymerase Chain Reaction (PCR) method, which is compatible with the method of sample collection used by the Producers Subcommittee of Ovicaprinos of the State of Michoacán (SPOEM). Two oligonucleotides (omp28f1 / omp28r3) were designed that had a detection threshold of up to 20 pg of Brucella DNA extracted from blood serum samples. The results obtained show a significant decrease in the number of false positives when compared with the Bengal Rose test. It was shown that the present development has a sensitivity of 100% and a specificity of 97%, when contrasting the diagnosis against a definitive test (Complement Fixation Test [PFC], according to NOM-41-ZOO-1995), while the PRB obtained 75%. Type X2 statistical analysis of the analyzed samples found that the results obtained by PRB are significantly different from those obtained by PFC, while the comparison of results by PCR against PFC showed no significant difference. This means that the use of PCR as a screening or screening test in the diagnosis of brucellosis will reduce the number of false positives and the inconvenience it causes.

La brucelosis es una zoonosis causada por microorganismos del género Brucella, produce aborto epizoótico en animales domésticos y una enfermedad febril septicémica o infecciones focalizadas en el humano. En México las pérdidas económicas se estiman en más de $ 2,000 millones al año. Por tanto, el presente trabajo describe el diseño de una técnica de diagnóstico molecular de brucelosis en cabras empleando el método de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), misma que es compatible con el método de recolección de muestras empleado por el Subcomité de Productores de Ovicaprinos del Estado de Michoacán (SPOEM). Se diseñaron dos oligonucleótidos (omp28f1/omp28r3) que presentaron un umbral de detección de hasta 20 pg de ADN de Brucella extraído de muestras de suero sanguíneo. Los resultados obtenidos muestran una sensible disminución en el número de falsos positivos al compararla con la prueba Rosa de Bengala. Se demostró que el presente desarrollo tiene una sensibilidad del 100% y una especificidad del 97 %, al contrastar el diagnóstico contra una prueba definitiva (Prueba de Fijación de Complemento [PFC], según la NOM-41-ZOO-1995), mientras que la PRB obtuvo un 75%. El análisis estadístico tipo X2 de las muestras analizadas encontró que los resultados obtenidos por PRB son significativamente diferentes a los obtenidos por PFC, mientras que la comparación de los resultados por PCR contra PFC no mostraron diferencia significativa. Esto supone que el empleo de PCR como prueba tamiz o de escrutinio en el diagnóstico de brucelosis, disminuirá el número de falsos positivos y los inconvenientes que provoca.

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CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA IIQB-M-2007-0001 PCR Diseminación Proteínas

Participación de las proteínas Ssq1p, Jac1p e lsu1p en la tolerancia a etanol de Saccharomyces cerevisiae

Luis Alberto Madrigal Pérez (2010)

Instituto de Investigaciones Químico Biológicas. Maestría en Ciencias en Biología Experimental

Protein biogenesis with Fe-S centers is one of the most important metabolic processes between the agencies. In the case of yeasts, this process is by a group of proteins encoded in a set of genes called isc (iron- Sulphur-cluster), among which are the genes SSQ1, JAC1 and ISU1. Proteins with Fe-S centers are involved in a large number of cellular processes such as: phosphorylation Oxidative stress, Krebs cycle, DNA replication and repair, amino acid biosynthesis, others. It is due to the large number of essential metabolic processes dependent, that Biogenesis of Fe-S centers turns out to be an essential mitochondrial metabolic pathway for Cell viability, at least in yeast. The objective of this work was to evaluate the participation of Ssq1p, Jac1p and Isu1p proteins, on the tolerance to ethanol in Saccharomyces cerevisiae. Transformation of the mutant strain of S. cerevisiae UMARN3.3 (Ura-) was performed. This strain Was transformed with the plasmids pYES2-SSQ1 (HIS) WT, pYES2-JAC1 (HIS) WT, pYES2- ISU1 (HIS) WT and pYES2. Transformation with these plasmids generated the strains UMARN3.3- SSQ1, UMARN3.3-JAC1, UMARN3.3-ISU1 and UMARN3.3-pYES2. The identification of the Proteins encoded by the cloned genes (Ssq1p, Jac1p and Isu1p) were performed by Western Blot. With the certainty of having the transforming strains with the correct expression of their proteins Ethanol tolerance analyzes were performed by Concentrations of ethanol. The results showed that the UMARN3.3- ISU1 and UMARN3.3-JAC1 presented better growth in the face of ethanol stress, Comparison with the UMARN3.3-SSQ1 strain and control with the vector.

La biogénesis de proteínas con centros Fe-S es uno de los procesos metabólicos más conservados entre los organismos. En lo que respecta a las levaduras, este proceso se lleva a cabo por un grupo de proteínas codificadas en un conjunto de genes denominados isc (iron- sulphur-cluster), entre los que se encuentran los genes SSQ1, JAC1 e ISU1 . Las proteínas con centros Fe-S están implicadas en gran número de procesos celulares como: fosforilación oxidativa, ciclo de Krebs, replicación y reparación del ADN, biosíntesis de aminoácidos, entre otros. Es debido al gran número de procesos metabólicos esenciales dependientes, que la biogénesis de centros Fe-S resulta ser una ruta metabólica mitocondrial esencial para la viabilidad celular, por lo menos en levaduras. El objetivo de éste trabajo fue evaluar la participación de las proteínas Ssq1p, Jac1p e Isu1p, sobre la tolerancia a etanol en Saccharomyces cerevisiae. Se realizó la transformación de la cepa mutante de S. cerevisiae UMARN3.3 (Ura -). Esta cepa se transformó con los plásmidos pYES2-SSQ1 (HIS) WT, pYES2-JAC1 (HIS) WT, pYES2- ISU1 (HIS) WT y pYES2. La transformación con estos plásmidos generó las cepas UMARN3.3- SSQ1, UMARN3.3-JAC1, UMARN3.3-ISU1 y UMARN3.3-pYES2. La identificación de las proteínas codificadas por lo genes clonados (Ssq1p, Jac1p e Isu1p) se realizó por Western blot. Con la certeza de tener las cepas transformantes con la correcta expresión de sus proteínas recombinantes, se hicieron los análisis de tolerancia a etanol mediante pruebas con concentraciones crecientes de etanol. Los resultados mostraron que las cepas UMARN3.3- ISU1 y UMARN3.3-JAC1 presentaron un mejor crecimiento ante el estrés por etanol, esto en comparación con la cepa UMARN3.3-SSQ1 y el control con el vector.

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CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA IIQB-M-2010-0002 Proteínas Etanol Fermentación

Descripción y caracterización de genes dehidrinas en chile piquín (capsicum annuum var. glabriusculum)

JOSÉ MARCIANO DE LA CRUZ OLIVARES (2013)

"Se compararon plantas de dos poblaciones de chile piquín, que crecen en condiciones de humedad contrastantes, en cuanto a su respuesta a condiciones de estrés hídrico en invernadero e In vitro. Los tratamientos consistieron en suspender el riego durante 16 días más un riego de recuperación y una evaluación final a 19 días. Las plantas control se regaron normalmente, se midió la tensión de agua en el suelo, potencial hídrico en hojas antes del amanecer y el contenido relativo de agua en las hojas. Las condiciones de estrés hídrico In vitro solo consistieron en poner hojas de plantas de chile a desecar en cajas Petri. En ambos experimentos (en invernadero e In vitro) se hizo análisis de la expresión por RT-PCR. También se hizo la caracterización del gen de dehidrina Tas14 en plantas de chile piquín adultas, esto se realizó haciendo Genome Walking y un posterior análisis bioinformático de la secuencia. Los datos de potencial hídrico y contenido relativo de agua en las hojas indicaron que la población de Coahuila perdió menos agua respecto a la población de Veracruz. En el análisis de expresión de dehidrinas solo se observaron diferencias en el gen KS18 que si parece responder al gradiente de la perdida de agua en condiciones de desecación de plantas de chile piquín. Los condiciones en las que se realizó el ensayo de sequía en plantas de chile y de acuerdo a los parámetros fisiológicos medidos determinan que el estrés hídrico impuesto fue severo, sin embargo las plantas recurren a otros mecanismos diferentes al de expresión de dehidrinas analizadas. Con la técnica de Genome Walking se obtuvo una secuencia de Tas14 de 610 pb, esta secuencia se ensambló con un cDNA de la base de datos de CINVESTAV, lo que da como resultado una secuencia de 1648 pb que contiene a toda la EST más el intrón detectado, la secuencia incluye una parte del promotor, la caja TATA está en la posición 464 y esto da la oportunidad de detectar algunos factores de regulación de transcripción."

The aim study was to campare two populations of “chile piquin” to test the response to water stress in greenhouse and In vitro. The treatments consisted in stop the watering during 16 days plus a three-day recovery period after watering. The control plants were irrigated every day. Several parameters were measured were water tension within the soil, leaf water potencial before sunrise and leaf relative water content. The In vitro water stress exoeriment was imposed to the chile plants by simply letting the chile leaves to dehydrate in Petri dishes. The Capsicum Dhn1, Dhn13, Tas14 and KS18 gene expression was analyzed by RT-PCR in both experiments. The data of water stress and relative water content in leaves indicated that the population of Coahuila lost less water in relation to the population of Veracruz. Within the analysis of dehydrin expression, only KS18 seems to be a water stress responsive gene under the conitions studied. The water stress accomplished was severe according to the conditions imposed and the physiological parameters measured; therefore, we concluded that chile piquin plants utilize different mechanisms to cope with water stress than those in which the dehydrins analyzed in this paper are involved

Master thesis

Proteínas Sequía Transcripción CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA

Rendimiento de forraje y valor nutritivo de alfalfa a diferentes intervalos de corte.

ADELAIDO RAFAEL ROJAS GARCIA SERGIO IBAN MENDOZA PEDROZA MARIA DE LOS ANGELES MALDONADO PERALTA PERPETUO ALVAREZ VAZQUEZ ALDENAMAR CRUZ HERNANDEZ Humberto Vaquera Huerta SANTIAGO JOAQUIN CANCINO (2019)

El objetivo fue determinar el efecto en intervalos de corte sobre el rendimiento de materia seca, relación hoja-tallo, proteína y digestibilidad in situ en hoja y tallo de alfalfa cv `San Miguelito¿, en el Altiplano Mexicano. Se establecieron cuatro intervalos de corte (3, 4, 5 y 6 semanas para

primavera-verano y 4, 5, 6 y 7 semanas para otoño-invierno) distribuidos aleatoriamente bajo un diseño experimental completamente al azar, con 4 repeticiones.

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Medicago sativa digestibilidad proteína rendimiento CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA CIENCIAS AGRARIAS OTRAS ESPECIALIDADES AGRARIAS

Análisis del efecto de oligogalacturónidos (OGs) sobre la ruta de señalización de la proteína TOR en maíz (Zea mays L.)

César Arturo Peña Uribe (2011)

Instituto de Investigaciones Químico Biológicas. Maestría en Ciencias en Biología Experimental

Cell growth (increase in size) is regulated by the TOR signaling pathway, which integrates environmental cues that modulate cell growth. In plants the final organ size is determined by its cell number and their ability to growth. Several proteins involved in the TOR signaling pathway are conserved in plants. Maize has been reported to be sensitive to rapamycin treatment contrary to Arabidopsis insensitivity. On the other hand, there are reports about the role of auxins in the activation of maize S6K. However, there is large variety of plant growth regulators, among them, cell wall fragments called oligogalacturonides have been described. The proposed mechanism through which oligogalacturonides modulate growth is by an interaction with auxin signaling. Here we report the effect of this kind of cell wall fragments on maize seedlings growth as well as on the activation of S6K which is component of the TOR signaling pathway. We found that oligogalacturonides inhibit coleoptile and primary root growth of seedling treated for ten days. We also found that the interaction with indol-3-acetic acid (auxin) signaling is different depending on the evaluated tissue. The effect shown in addition with the inhibitor rapamycin suggest an interaction of oligogalacturonides with the TOR signaling pathway. This observation was confirmed by western blot, indicating a modulation of S6K activity in response to oligogalacturonides treatment.

Estudios en las dos últimas décadas en mamíferos, señalan que el crecimiento celular (incremento en tamaño) está regulado principalmente por la vía de señalización de la proteína mTOR, (por sus siglas en ingles mammalian Target Of Rapamycin) la cual integra las señales ambientales (factores de crecimiento, nutrientes, etc.) que modulan el crecimiento. Al igual que en mamíferos, el tamaño final de los órganos de una planta está determinado por el número de células que lo conforman, así como de la capacidad de estas para crecer y se han descrito varias proteínas ortólogas de la vía de señalización de TOR. Específicamente en maíz, se ha reportado que contrario a Arabidopsis, es sensible a la rapamicina. Además, esta vía de señalización es activada por la presencia de auxinas. Sin embargo, existen diversos compuestos capaces de regular el crecimiento vegetal, tal es el caso de los fragmentos de pared celular denominados oligogalacturónidos. Se ha propuesto que estos compuestos modulan el crecimiento y desarrollo vegetal a través de una interacción con la vía de señalización de auxinas. En este trabajo reportamos el efecto de estos fragmentos de pared celular sobre el crecimiento y desarrollo de plántulas de maíz, así como su participación en la activación de la proteína S6K la cual es componente de la vía de señalización de TOR. Se encontró que los oligogalacturónidos inhiben el crecimiento del coleóptilo y la raíz primaria de las plántulas tratadas durante diez días. La interacción con el ácido indol-3-acético (auxina) indicó que existen diferencias en la señalización de ambos compuestos dependiendo del tejido. El uso del inhibidor del crecimiento, la rapamicina, mostró una posible interacción de los oligogalacturónidos con la vía de señalización de TOR, lo cual fue corroborado mediante un análisis electroforético en 2 dimensiones y el western blot de los extractos crudos de las plántulas tratadas, con anticuerpos contra la proteína S6K.

Master thesis

CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA IIQB-M-2011-0006 Oligogalacturónidos Proteína TOR

Evolución dirigida de la enzima 3-Metil- Crotonil-Coenzima A (MCCasa) carboxilasa de Pseudomonas aeruginosa

César Díaz Pérez (2012)

Instituto de Investigaciones Agropecuarias y Forestales. Instituto de Investigaciones sobre los Recursos Naturales. Instituto de Investigaciones Químico Biológicas. Facultad de Biología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Facultad de Químico Farmacobiología. Programa Institucional de Doctorado en Ciencias Biológicas

Biotin dependent enzymes form a ubiquitous superfamily in the three domains of life; these enzymes catalyze the carboxylation or decarboxylation of a wide variety of substrates, as well as they play a key role in the metabolic pathways where these proteins participate. One enzyme of this superfamily is the 3-methylcrotonyl-CoA carboxylase (MCCase; E.C.6.4.1.4), which catalyze the 3-methylcrotonyl-CoA (MCCoA) carboxylation to produce 3-methylglutaconyl-CoA (MGCoA). The MCCase from Pseudomonas aeruginosa has been studied in our group, and we have seen that it is involved in the catabolism of leucine and acyclic monoterpenes of citronellol family. Enzymes of this superfamily are composed by several protein domains, which are essential to carry out their function. The transcarboxylation domain (CT) is responsible for the recognition of the substrate to be carboxylated and for the transference of the carboxyl group. In this work, the evolutionary history of the CT domain that recognizes the substrates-CoA has been constructed. The findings indicate that these domains constitute a superfamily with diverse substrate-CoA recognition, named here as transcarboxylase CoA-dependent superfamily (TDC). The TDC superfamily is constituted by two lineages, the first one corresponds to proteins that encode the CT domain in two separated genes (sCT), and the second lineage contain proteins that the encode CT domain in a single gene (cCT). To understand the evolutivary history of these domains, a phylogenetic analysis of the subdomains from the CT-domain was conducted. Phylogenetic trees showed that the TDC superfamily is constituted by nine main groups, according to the recognized substrates. The analysis also shows that all members of this superfamily are formed by two subdomains, which probably derivate from a very ancient gene duplication event. Structural analysis of crystallized members of TDC superfamily shows that the functional unit is a dimer of CT domains.

Las enzimas dependientes de biotina forman una superfamilia ubicua en los tres dominios de la vida, catalizan la carboxilación o descarboxilación de una amplia variedad de substratos y son enzimas clave en las rutas metabólicas donde participan. Una de las enzimas de esta superfamilia, la 3-metilcrotonil-CoA carboxilasa (MCCasa; E.C.6.4.1.4), cataliza la carboxilación del 3-metilcrotonil-CoA (MCCoA) para formar 3-metilglutaconil-CoA (MGCoA). La MCCasa de la bacteria Gram negativa Pseudomonas aeruginosa ha sido objeto de estudio en nuestro grupo de trabajo y se le ha involucrado en el catabolismo de leucina y de monoterpenos acíclicos de la familia del citronelol. Las enzimas de esta superfamilia están formadas por varios dominios proteicos bien definidos, los cuales son esenciales para llevar a cabo su función. El dominio de transcarboxilación (CT) se encarga del reconocimiento del substrato a carboxilar y de la transferencia del grupo carboxilo. En este trabajo se reconstruyó la historia evolutiva de los dominios CT, encontrándose que estos dominios forman una superfamilia que reconoce substratos con coenzima A, por lo que se nombró como superfamilia de transcarboxilasas dependientes de CoA (TDC). Esta superfamilia está formada por dos linajes, el primero que corresponde a las proteínas que codifican el dominio en dos genes (sCT) y el linaje de las proteínas que codifican al dominio CT en un solo gen (cCT). Para entender la historia evolutiva de los dominios se efectuó la filogenia de los subdominios del dominio CT, la cual arroja nueve familias, que se dividen de acuerdo al substrato que reconocen. Los árboles filogenéticos indican que todos los miembros de la familia están formados por dos subdominios, los cuales probablemente surgieron de un evento de duplicación génica. Al analizar la estructura de los miembros cristalizados de la superfamilia TDC, se observó que la unidad funcional es un dímero de dominios CT.

Doctoral thesis

CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA IIQB-D-2012-0003 Opción en Biología Experimental Carboxilación Sustratos Proteínas

Estudio de la interactómica in vivo del baculovirus SfNPV-Ar en su hospedero Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae)

JONATAN CARMEN RANGEL NUÑEZ (2021)

Spodoptera frugiperda es la plaga de mayor importancia para la producción de maíz en América; con el peligro de extenderse al resto del mundo. Actualmente el control de esta plaga está migrando hacia alternativas a las que no presente resistencia, dentro de las cuales se encuentra un baculovirus denominado SfNPV-Ar. Este microorganismo ha mostrado a nivel de laboratorio y campo su potencial para ser usado en el control del gusano cogollero S. frugiperda. La alta virulencia mostrada por el virus llevó a realizar un estudio transcriptómico y proteómico, para determinar el efecto del virus en las células columnares del intestino medio de S. frugiperda. Como resultado de la secuenciación e identificación de los genes y proteínas regulados por la infección a las 6, 12 y 24 hpi, se obtuvo que el virus induce un sistema de defensa basado en el aumento de la concentración de peróxido. Al mismo tiempo que se apaga la expresión de un modulador de la producción de especies reactivas de oxígeno, se determinó que el virus induce desde las etapas tempranas de la infección, un aumento en los genes relacionados al tráfico de lípidos

en el citoplasma, el cual podría ser causado por el aumento de las necesidades energéticas de las células o bien por la oxidación lipídica que sufre la membrana celular al acumularse el peróxido. De igual manera se determinó una sobre expresión de genes involucrados en el rearreglo del citoesqueleto, así como un arresto del ciclo celular, entre las 6 y 12 hpi, coincidiendo con las etapas previas al inicio del ensamble de las núcleo cápsides. Finalmente, a las 24 hpi, se determinó que la infección viral apagaba los procesos de rearreglo del citoesqueleto, metabolismo y arresto del ciclo celular, mientras que genes y proteínas relacionadas con la activación de la apoptosis fueron sobre expresados. Esto último podría estar relacionado al fenómeno por el cual el intestino infectado por baculovirus es el único de los tejidos que se recupera de la infección. Esta investigación aporta nuevo conocimiento en el desarrollo del proceso de infección de los baculovirus y sus hospederos, y permitirá entender como estas relaciones co-evolutivas virus-huésped, inciden en la efectividad de los baculovirus como agentes de control biológico, para así poder optimizar en el futuro, su uso como tal.

The fall armyworm is the most important pest in the maize production in the Americas continent. The control of the pest is carried out primarily by chemical products, but alternatives of control are gaining importance, alternatives like the use of the entomopathogenic virus SfNPV-Ar, this virus shows high virulence against the fall arming worm in laboratory and field. The aims of this work were to identify the effect of the primary infection by the determination of the regulation of gens and protein in three times post infection (6, 12 and 24 h). As a result of the transcriptomic and proteomic identification we found an induction of cellular defense by the accumulation of peroxide; but at the same time, the virus down regulates the main productor system of reactive oxygen species. In the other hand the infection increases the expression of genes and proteins related with mobility of cytoplasm lipids and metabolism, the cytoskeleton reorganization and cell cycle arrest, all above between the 6 and 12 hours post infection; according with the beginning of the replication of the NC. Finally, 24 hours post infection the infected cells showed a down regulation of genes and proteins related with cytoskeletal, metabolism and cell cycle arrest; at this time, the cells showed an upper regulation of genes and proteins whose function was associated to the activation of the apoptotic prosses. All above showed

how the virus took the control of the cellular machinery to control de cellular proliferation, grew up and activated defense mechanism against reactive oxygen species, in the first hours post infection, in the latest times all mechanism was shut down followed by an apoptosis signal. This could answer why the intestine was the only tissue that did recovery from de viral infection. This research brings new knowledge in the development of the infection process of baculoviruses and their hosts and will allow understanding of how these co-evolutionary virus-host relationships affect the effectiveness of baculoviruses as biological control agents so that they can optimize their use as such in the future.

Doctoral thesis

CIS- Doctorado en Biociencias CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA CIENCIAS AGRARIAS AGROQUÍMICA Interactómica Gusano cogollero – Control biológico Baculovirus SfNPV-Ar ARN (Ácido Ribonucleico) Proteínas Expresión diferencial Plagas Interactomal Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) Baculoviridae SfNPV-Ar RNA (Ribonucleic Acid) Protein Differential expression Pests

Efectos de la suplementación alimenticia preparto sobre comportamiento materno-neonatal y niveles de metabolitos en suero sanguíneo de cabras

NORMA ELISA HERNANDEZ MACIAS (2014)

"Se evaluó el efecto suplementación alimenticia a 15 y 35 días preparto, sobre el comportamiento madre-cría y las concentraciones plasmáticas de colesterol, glucosa y proteínas totales en cabras. Se utilizaron 3 grupos de cabras mestizas (criollo x cabras lecheras) gestantes pluríparas, pastoreando en agostadero bajo las condiciones semiáridas del norte de México (26° N, 103° W, a 1117 msnm, 225 mm de precipitación anual). Los grupos se conformaron por cabras con peso y condición corporal similares. El grupo Control GC (n=7) no 5 recibió suplementación en el corral. El Grupo G15 (n=8) recibió a las 0800 h, 500 g/animal de un suplemento alimenticio (20% pollinaza, 37% maíz rolado, 37% salvado, 4% melaza y 2% de sal) hasta que salían a pastoreo, durante 15 días preparto y 7 días al parto. . El Grupo G35 (n=8) recibió el mismo suplemento de la misma manera que G15 durante -35 y +7 días al parto. Para evaluar el comportamiento sobre el reconocimiento se llevó a cabo una prueba de discriminación a las 4 h postparto para madre-cría y a las 8 h postparto para cría-madre. La toma de muestras sanguíneas fue por venopunción yugular a los -35, -7, 0, +7 y +15 días en relación al parto y se obtuvieron, por espectrofotometría, los valores plasmáticos para colesterol, glucosa y proteínas totales. Las concentraciones sanguíneas para glucosa, colesterol y proteínas totales no difirieron entre tratamientos (P > 0.05) por los tratamientos. Las madres del GC pasaron más tiempo buscando a sus crías y emitieron más balidos bajos a las 4 h posparto (P > 0.05) en comparación con los grupos G15 y G35. En general, la suplementación alrededor del parto impulso una relación cría-madre más estrecha a las 8 h posparto mediante incrementos en la actividad vocal de las crías, en la búsqueda de su madre. Siendo esto último de importancia fisiológica y etológica en los sistemas de producción extensiva de cabras."

"This study aimed to evaluate the effect of either 15 or 35 d of prepartum nutritional supplementation upon maternal-neonatal behavior and plasma concentrations of cholesterol, glucose and total proteins in three groups of adult pregnant goats near to kidding under grazing-semiarid rangeland conditions in northern México (26 NL, 103°WL, at 1117 m, 225 mm rainfall). A total of 23 goats with similar body weight and condition were divided in three experimental groups: Control Group (GC; n=7) was non supplemented. Group G15 (G15; n=8) was 7 supplemented from -15 d pre-partum up to +7 d post-partum; goats were supplemented prior grazing, at 0800 h, with a 500 g of a mixture of 20% pollinaza, 37% rolled corn, 37% bran, 4% treacle and 2% salt. Group G35 (G35; n=8) received the same supplement as G15 but from -35 d pre-partum up to +7 d post-partum. To evaluate their ability to differentiate their own kid from an alien kid, a Discrimination Test was carried out at 4 h post-partum for mothers, and 8 h post-partum for kids. Blood samples (10 mL) were aseptically collected from the jugular vein on days -35, -15, 0, +7 and +15 with respect to the kidding day. Serum concentration of cholesterol, glucose and total protein values were obtain by spectrophotometry. Serum concentrations for total protein, glucose and cholesterol were not affected (P> 0.05) by treatments. Besides, GC-dams spent more time seeking their offspring and emitted more low-pitched bleats 4-h post-partum (P< 0.05) in a two-choice test regarding G15 and G35 groups. In general, peri-partum supplementation promoted a closer dam-kid attachment at 8-h post-partum while encouraged a closer dam-offspring relationship throughout increases in vocal activity and seeking doe´s behavior for their kids shortly after parturition. The last being of physiological and behavioral significance to marginal goat production systems."

Master thesis

Comportamiento maternal Cabritos comportamiento Metabolitos Glucosa Colesterol Proteínas CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA